通过体外转录（IVT）获得的mRNA，在其反应混合物中不仅包含目标mRNA产物，还混杂有蛋白质（如T7 RNA聚合酶和无机焦磷酸酶）、NTP、模板DNA、盐离子、各类添加剂及IVT过程中生成的mRNA副产物（如dsRNA和截断RNA片段）等。这些杂质的存在可能会对mRNA的功能产生负面影响，如影响mRNA的定量准确性、降低翻译效率或改变其免疫原性。因此，有必要通过纯化技术将目标mRNA从混合物中分离出来，以确保其纯度和完整性，从而保证产品的安全性和有效性。

常见的mRNA纯化方式包括氯化锂（LiCl）沉淀、硫酸铵沉淀、磁珠纯化、硅胶柱膜纯化及层析纯化等。氯化锂沉淀法是一种相对传统的mRNA纯化方法，该方法依赖于锂离子在特定pH下能显著减少RNA分子之间的同电性相斥，从而使RNA更容易聚集并形成沉淀。然而，工业生产中可能出现锂盐残留的毒性问题，且该方法通常需要低温条件，带来了较高的能耗及设备要求。

硫酸铵沉淀法的效率已在2024年由中科院过程工程研究所张松平团队的研究中得以确认，沉淀率可高达95%。最佳条件为2M硫酸铵（AS），pH 7.0，温度20℃，沉淀时间2小时。此外，硫酸铵的去除NTP和DNA模板的效率显著高于LiCl沉淀法，同时在室温下便于工业化应用，提升了生产效率。

硅胶柱膜纯化技术则利用硅胶膜表面的硅醇基团与mRNA之间的相互作用，能够卓有成效地分离mRNA及杂质。因为硅胶膜对蛋白质、多糖和脂类等杂质的吸附性极低，使得在离心过程中能有效分离出mRNA与杂质。此外，材料安全无毒，符合环保理念，增强了实验室的安全性。

在此过程中，磁珠法凭借修饰的氧化铁磁珠颗粒，能够与mRNA结合并通过磁场实现纯化。尽管其在去除蛋白和杂质方面表现优良，但需注意磁珠的摩耗及储存条件，以维持其高效性。同时，层析法，特别是Oligo(dT)亲和层析，成为工业级别mRNA纯化的重要技术，其原理与磁珠法相似，通过高盐结合和低盐洗脱来纯化mRNA。

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值得注意的是，使用蛋白酶K进行纯化时，需平衡添加量以保证mRNA的安全性和有效性。针对早期研发阶段的客户，88858cc永利官网也提供CRO服务、概念验证服务及质检服务，满足多样化的需求。

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